초록 |
옥사진 170은 암모니아 농도에 따라 두 파장대(λem = 565 nm, λem = 630 nm)에서 형광을 발생한다. 두 형광 파장대(λem = 565 nm, λem = 630 nm)에서의 형광세기를 비율적인 방법으로 계산하여 용액내의 암모니아 농도를 측정할 수 있다. L-아르기닌은 효소인 아르기나제에 의해 L-오르니틴과 우레아로 가수분해 되고, 우레아는 다시 효소인 우레아제에 의해 암모니아로 가수분해 된다. 이때 생성되는 암모니아를 옥사진 170을 이용하여 형광세기를 측정함으로써 L-아르기닌의 농도를 측정 할 수 있는 형광센서막을 본 연구에서 연구하였다. 두 형광세기의 비율적 계산 방법에 의하면 아르기닌은 0.01 M ~ 0.1 M, 0.1 M ~ 1 M의 농도에서 선형 범위를 갖는다. 효소를 고정한 형광센서막은 pH 5 ~ pH 9 범위에서는 pH가 증가할수록 형광세기가 증가하였고 25℃에서의 형광세기는 조금 낮았지만 30℃~40℃의 범위에서는 형광세기가 비슷하였다. 또한 이온의 영향을 알아보기 위해 K+와 Na+을 각각 0 mM ~ 300 mM의 범위에서 측정하였다. 본 연구에서 개발한 형광센서막은 미생물공정에서 중요한 아미노산인 L-아르기닌을 검출하는데 사용될 수 있다. |