화학공학소재연구정보센터
학회 한국화학공학회
학술대회 2013년 봄 (04/24 ~ 04/26, 광주 김대중컨벤션센터)
권호 19권 1호, p.327
발표분야 분리기술
제목 Pretreatment methods of egg yolk for reversed phase HPLC
초록 난황에서 Immunoglobulin Yolk (IgY)를 효과적으로 분리하는 전처리 방법을 찾기 위해서 여러 가지 실험을 하였다. 난황의 주요 성분은 단백질과 지질로 단백질은 난황의 15 ~ 17%를 차지한다. 난황 속의 단백질은 α, β, γ-livetin으로 구성되어 있으며 이 중 γ-livetin이 IgY 면역단백질로 존재한다. 난황에서 IgY를 분리하기 위해 인지질 및 다른 단백질을 침전시키는 전처리 과정을 연구하였다. 
인지질을 분리하기 위해 난황과 증류수의 비율을 1 : 2.5로 하여 점도를 낮춘 희석용액에서 1.5 g/L와 0.1 g/L κ-carrageenan 수용액은 희석용액 부피의 두 배로 첨가하였고 PEG 4000은 시료의 최종 부피의 35 g/L만큼, Arabic Gum은 최종 부피의 5 mg/L만큼 첨가하였다. 인지질을 빠르게 침전시키기 위한 원심분리 조건을 찾기 위해 인버터 제어 원심분리기 (Hanil)를 사용해 4 ℃에서 30분간 원심 분리하였는데, 이 때 속도를 5000 rpm과 10000 rpm으로 바꾸어 비교하였다. 전처리 된 샘플을 30% acetonitrile 용액을 이동상으로 하여 Zorbax (300SB-C18 5 μm, 4.6×250 mm, Agilent) 컬럼에서 유속 1.0 mL/min으로 HPLC로 10 분간 분석하였다. 
Arabic Gum을 5 mg/L 첨가하고 원심분리 속도를 5000 rpm으로 하면 크로마토그래피 피크가 두 개로 분리되었다. 또한 1.5 g/L κ-carrageenan 수용액을 첨가하고 5000 rpm으로 원심 분리하면 높이가 가장 높은 단일 피크가 나왔다.
저자 김지은, 김도현, 김인호
소속 충남대
키워드 IgY; HPLC; pretreatment
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